Servm Botanical Institute SÉRUM ACTIVO ANTIMANCHAS

1. INHIBICIÓN DE LA ACTIVIDAD DE LA TIROSINASA E INHIBICIÓN DE LA MELANINA

Se incubaron melanocitos murinos B16 en condiciones basales (medio de cultivo estándar; nivel de pigmentación bajo) durante 24 horas con la fracción activa de DARKOUT™, ácido kójico o medio de cultivo (control). Los parámetros que se midieron fueron el número de células viables, el contenido normalizado de melanina (g de melanina/mg de proteína) y las actividades específicas de la tirosina hidroxilasa y la dopa-oxidasa. La actividad de la tirosina hidroxilasa se midió mediante la prueba radiométrica descrita por Pomeranz (1964) y la actividad de la dopa-oxidasa se midió por medio de espectrofotometría. Todos los resultados están normalizados respecto al control.

Se realizó una prueba similar con melanocitos murinos B16 que se preincubaron durante 48 horas con a-MSH, una hormona estimulante de los melanocitos. De este modo se producen melanocitos con un nivel de pigmentación más elevado, que puede ser más parecido a las condiciones de hiperpigmentación que se presentan en la piel. Después de un tratamiento con a-MSH, los melanocitos B16 se incubaron durante 24 horas con la fracción activa de DARKOUT™, ácido kójico o el medio de cultivo (control). Una vez más, los parámetros que se midieron fueron el número de células viables, el contenido normalizado de melanina (μg de melanina/mg de proteína) y las actividades específicas de la tirosina hidroxilasa y la dopa- oxidasa. Los resultados están normalizados respecto al control.

Los resultados indican que, en ambas condiciones experimentales, la fracción activa del extracto de rizoma de Hypoxis rooperi produjo una reducción considerable de las actividades de la tirosina hidroxilasa y la dopa-oxidasa en comparación con el ácido kójico, que tuvo un efecto muy reducido en la misma baja concentración. Además, el contenido de melanina también fue menor en el caso del extracto de hypoxis que con el ácido kójico; este efecto fue incluso más apreciable en las células tratadas con a-MSH.

2. INHIBICIÓN DE LA EXPRESIÓN DE LA TIROSINASA

A continuación, se lisaron melanocitos murinos B16 tratados en las mismas condiciones de la prueba anterior y se cuantificó la concentración de tirosinasa mediante Western blot con anticuerpos de tirosinasa específicos aDEP7.

Tanto en el caso de los melanocitos basales como en los activados por aMSH, el tratamiento durante 24 horas con extracto purificado de Hypoxis rooperi (DARKOUT™) produce una reducción de la expresión de la tirosinasa. La intensidad densiométrica de las bandas de Western blot se expresa en el gráfico superior, normalizada para la cantidad de proteína.

CONSEJO: ES IMPORTANTE UTILIZAR UN PROTECTOR SOLAR CUANDO UTILICES COSMÉTICA ANTIMANCHAS.